發(fā)酵罐操作流程:
一,準(zhǔn)備
檢查電路、水路、氣路(蒸汽、空氣)、閥門、儀表是否正常
1,將所有閥門、電控開關(guān)打到關(guān)停位置;
2,打開蒸汽總閥;
3,打開排冷凝水閥,待冷凝水排完后關(guān)閉此閥;
4,打開空氣總閥;
5,打開循環(huán)水總閥;
6,打開電源總開關(guān),以及儀表電源、控制回路電源、各支路(光照,攪拌)電源開關(guān)。
二,空氣精過濾器滅菌
消除精過濾器及過濾器到發(fā)酵罐之間的所有管路的雜菌,保證精過濾器處于無菌狀態(tài),并作好各項(xiàng)操作記錄
1,打開蒸汽支閥、空氣支閥,按壓控復(fù)位按扭
2,打開“蒸汽--空氣閥”;
3,打開精過濾器下邊的排冷凝水閥,待冷凝水排完后,將此閥打到微開狀態(tài);
4,將自動(dòng)補(bǔ)壓開關(guān)打到手動(dòng)位置,使補(bǔ)壓電磁閥處于開通狀態(tài);
5,打開精過濾器后邊的補(bǔ)壓手動(dòng)閥;
6,打開進(jìn)罐氣液混合閥上的小閥,打開進(jìn)料閥上端的小閥,打開“精空氣--上料閥”上的小閥,直到各小閥有蒸汽“絲絲”噴出為止,保證有一定量的蒸汽通過精過濾器;
7,調(diào)節(jié)“蒸汽--空氣閥”,使精過濾器上的壓力表指示在0.11MP--0.15MP之間,并保持30分鐘;
8,計(jì)時(shí)完畢,迅速打開空氣閥并關(guān)閉“蒸汽-空氣閥”,吹干吹涼,一般二十分鐘可達(dá)到要求;
9,關(guān)閉所有相關(guān)小閥門。
三,空消
直接將蒸汽通入發(fā)酵罐內(nèi),對(duì)發(fā)酵罐進(jìn)行滅菌,并對(duì)所有電路、管路、儀表及發(fā)酵罐進(jìn)行全面檢查,并作好各項(xiàng)操作記錄
1,將“滅菌--發(fā)酵”開關(guān)打到滅菌位置;
2,關(guān)閉補(bǔ)壓手動(dòng)閥,半開排氣閥;
3,打開夾套下排水閥;
4,打開“蒸汽--精空氣閥”;
5,打開“精空氣--上料閥”、上氣液混合閥,使蒸汽從上路進(jìn)入發(fā)酵罐內(nèi);
6,打開下氣液混合閥、卸料底閥,使蒸汽從下路進(jìn)入發(fā)酵罐內(nèi):
7,當(dāng)溫度達(dá)到121度時(shí),打開取樣閥、取樣滅菌閥,微開過料閥及過料閥小閥門,調(diào)節(jié)“蒸汽--精空氣閥”、上氣液混合閥、排氣閥以及下氣液混合閥、卸料底閥,將溫度控制在121-125度之間,壓力控制在0.11-0.15MP之間,保持30分鐘
8,計(jì)時(shí)完畢,依次關(guān)閉卸料底閥、下氣液混合閥、上氣液混合閥、取樣閥、取樣滅菌閥、過料閥、過料小閥、“精空氣--上料閥”、“蒸汽--精空氣閥”;
9,半開排氣閥。
四,加料
將培養(yǎng)基從加料桶泵壓到發(fā)酵罐
1,將配好的培養(yǎng)基加入加料桶,攪拌均勻,調(diào)PH值到規(guī)定值;
2,打開排氣閥;
3,關(guān)閉料桶排水閥,打開入泵閥,出泵閥,閉合上料泵電源;
4,打開進(jìn)料閥;
5,打開上氣料混合閥,使培養(yǎng)基從上路進(jìn)入發(fā)酵罐內(nèi);
6,打開“精空氣--上料閥”,打開下氣液混合閥,以及卸料底閥,使培養(yǎng)基從下路進(jìn)入發(fā)酵罐;
7,當(dāng)培養(yǎng)基達(dá)到規(guī)定劑量時(shí),關(guān)閉卸料底閥、“精空氣--上料閥”、進(jìn)料閥、上氣料混合閥;
8,關(guān)閉上料泵入、出閥,關(guān)閉上料泵電源。
五,實(shí)消
用蒸汽對(duì)罐內(nèi)的培養(yǎng)基全面*滅菌,作好各項(xiàng)操作記錄
1夾套預(yù)熱:
A,將“滅菌--發(fā)酵”開關(guān)打到滅菌位置;
B,打開夾套下排水閥;
C,打開夾套蒸汽閥;
D,半開排氣閥;
E,當(dāng)夾套底部*發(fā)燙時(shí),關(guān)小夾套泄水閥,調(diào)整夾套蒸汽閥,使夾套壓力不高于0.05MP;
F,調(diào)整排氣閥;
G,當(dāng)溫度達(dá)到50度時(shí)開攪拌;
F,當(dāng)發(fā)酵罐溫度達(dá)到100度時(shí),關(guān)閉夾套蒸汽閥。
2,發(fā)酵罐內(nèi)通蒸汽:
A,關(guān)閉補(bǔ)壓手動(dòng)閥,打開“蒸汽--精空氣閥”、“精空氣--上料閥”、上氣液混合閥,使蒸氣從上路進(jìn)入發(fā)酵罐;
B,打開下氣液混合閥、卸料底閥,使培蒸氣從下路進(jìn)入發(fā)酵罐;
C,關(guān)閉種子罐上氣液混合閥、補(bǔ)壓手動(dòng)閥,打開種子罐“蒸汽--精空氣閥”、下氣液混合閥、輸料閥、過料閥,使蒸汽從中路進(jìn)入發(fā)酵罐;
D,調(diào)整排氣閥,使溫度與壓力同步上升;
E,當(dāng)溫度上升到121度,壓力到達(dá)0.11MP,調(diào)整“蒸汽--精空氣閥”、排氣閥,使發(fā)酵罐內(nèi)溫度保持121--125度之間,壓力在0.11--0.15MMP之間,并計(jì)時(shí)30分鐘
F,保溫保壓30分鐘后,依次關(guān)閉卸料底閥、下氣液混合閥、“精空氣--上料閥”、過料閥、種子罐輸料閥、“蒸汽--精空氣閥”,打開種子罐手動(dòng)補(bǔ)壓閥、上氣液混合閥。
六,冷卻
盡量快速將滅菌后的培養(yǎng)基冷卻到可以接菌的溫度,一般在30--35度,并作好各項(xiàng)操作記錄
1,關(guān)閉夾套下排水閥;
2,打開夾套上排水閥;
3,打開強(qiáng)制冷卻閥;
3,將“滅菌--發(fā)酵”開關(guān)打到發(fā)酵位置,將補(bǔ)壓開關(guān)打到自動(dòng)位置,打開補(bǔ)壓手動(dòng)閥,關(guān)小上氣液混合閥
4,當(dāng)溫度降到80度時(shí)開攪拌;
6,當(dāng)溫度降到30--35度之間,關(guān)閉強(qiáng)制冷卻閥,將冷卻開關(guān)打到自動(dòng)位置。
七,接菌
將種子罐種液壓力輸送到發(fā)酵罐
1,關(guān)閉種子罐上氣液混合閥、手動(dòng)補(bǔ)壓閥,打開種子罐“蒸氣--精空氣閥”、下氣液混合閥;
2,打開過料閥的小閥門,至有蒸汽“絲絲”噴出;
3,持續(xù)30分鐘后,迅速打開種子罐補(bǔ)壓手動(dòng)閥,關(guān)閉種籽罐“蒸氣--精空氣閥”,吹干吹涼過料管,一般為二十分鐘左右;
4,將種子罐補(bǔ)壓開關(guān)打到手動(dòng)位置,手動(dòng)控制種子罐手動(dòng)補(bǔ)壓閥或者上氣液混合閥,使種子罐壓力高于發(fā)酵罐壓力,種子罐壓力*高不超過0.11MP;
5,將發(fā)酵罐補(bǔ)壓開關(guān)打到停的位置,調(diào)整排氣閥,使兩罐獲得較大的壓差,但發(fā)酵罐壓力不能低于0.02MP;
6,打開種子罐卸料底閥,關(guān)閉種子罐下氣液混合閥;
7,待過料閥的小閥門有種液漏出,迅速關(guān)閉小閥門,打開過料閥;
8,待種子罐內(nèi)種液壓輸完畢后,種子罐壓力會(huì)迅速下降,此時(shí)關(guān)閉過料閥,關(guān)閉種子罐各閥;
9,將自動(dòng)補(bǔ)壓開關(guān)打到自動(dòng)位置。
八,發(fā)酵
為結(jié)種后的料液提供適宜的溫度,正確的壓力,充分的光照,足夠的溶氧,每隔半小時(shí),記錄一次溫度、壓力、光照電壓、電流,隨時(shí)檢查各閥門與各開關(guān)所處的位置是否正確。
1,菌肥:
A,關(guān)閉排氣閥;
B,打開**組燈管(1.3.5.7燈管),并將燈管電壓調(diào)到190伏,二十四小時(shí)后,開第二組燈管(2.4.6.8燈管),同樣將燈管電壓調(diào)到190伏,再過二十四小時(shí),將兩組燈管電壓調(diào)至200--210伏,再過二十四小時(shí),將兩燈管電壓調(diào)到220伏
2,飼料添加劑:
A,調(diào)整排氣閥,使排氣流量計(jì)指示1.5--2.0立方米之間;
B,用黑布遮住上下視窗;
C,將加熱開關(guān)打到自動(dòng)加熱位置。
九,取樣
發(fā)酵過程中,及時(shí)了解發(fā)酵狀況,為化驗(yàn)提供*佳基樣,為產(chǎn)品合格提供有力依據(jù)
1,打開“蒸汽--精空氣閥”;
2,打開取樣滅菌閥,開度以有蒸汽“絲絲”噴出為佳,計(jì)時(shí)30分鐘;
3,計(jì)時(shí)完畢,迅速打開“精空氣--上料閥”,關(guān)閉“蒸汽--精空氣閥”,吹涼取樣管;
3,打開取樣閥,關(guān)閉取樣滅菌閥,火焰圈套在三角瓶口,使基樣從火焰圈中流入三角瓶,接適量基樣后,關(guān)閉取樣閥。
十,出料
將發(fā)酵好的藥液無菌送至灌裝緩沖罐,保證罐裝順利進(jìn)行,并記錄出罐起止時(shí)間
1,清洗出料管過濾器;
2,打開“蒸汽--精空氣閥”、下氣液混合閥、輸料閥、輸料三通閥;
3,調(diào)整罐裝緩沖罐進(jìn)料閥,使緩沖罐排氣閥有大量蒸汽冒出,微開緩沖罐排水閥,將冷凝水排出,并保持30分鐘;
4,計(jì)時(shí)結(jié)束,迅速打開“精空氣--上料閥”,關(guān)閉“蒸汽--精空氣閥”、上氣液混合閥,吹干吹涼輸料管,一般為20分鐘;
4,打開卸料底閥,關(guān)閉下氣料混合閥、“精空氣--上料閥”,打開上氣液混合閥,
5,有藥液進(jìn)入緩沖罐時(shí),關(guān)閉緩沖罐排水閥;
6,若為菌肥,還需將照明電壓調(diào)到0 伏;
7,調(diào)整緩沖罐進(jìn)料閥,使緩沖罐內(nèi)液體不超出液位玻璃管上下刻線(上刻線離緩沖罐頂部10厘米,下刻線離緩沖罐底部10厘米)。
十一,清洗
出料結(jié)束后, 將罐內(nèi)殘留藥液沖洗干凈,以保設(shè)備的清潔性
1,將所有電控開關(guān)打到關(guān)停位置;
2,關(guān)閉輸料閥,打開排氣閥、清洗排水閥;
3,打開視窗,用高壓水槍沖洗,或用其他方法,直到罐內(nèi)各玻璃管、發(fā)酵罐壁、各棱角*干凈為至;
4,關(guān)閉清洗排水閥,向發(fā)酵罐內(nèi)注入一定量的沖洗水,打開輸料閥,調(diào)整罐裝緩沖罐的排水閥,直至卸料管,出料管過濾器與罐裝緩沖罐清洗干凈為止;
5,關(guān)閉所有閥門;
6,如繼續(xù)使用,向發(fā)酵罐內(nèi)加注培養(yǎng)基,若閑置不用,則向罐內(nèi)注滿清水,擰緊玻璃視鏡。